Мужской хор «Оптина Пустынь» был создан на Успенском подворье монастыря Оптина Пустынь в Санкт-Петербурге. Первая знаменная литургия была отслужена 15 сентября 1996 года. Со временем коллектив стал творческой лабораторией по возвращению певческого наследия Древней Руси из рукописных собраний академических библиотек в богослужебную практику. Сегодня, помимо древнерусских одноголосных распевов, на богослужениях Подворья звучат разные виды русского церковного многоголосия: строчное пение и ранний партес, а также распевы Греции, Сербии, Болгарии и Грузии. Кроме того, хор исполняет как композиторские и собственные версии церковных распевов, так и авторские сочинения церковных композиторов.
Основатель коллектива, художественный руководитель и регент Александр Семёнов окончил дирижерско-хоровой факультет Петербургской консерватории, где дополнительно изучал древнерусские нотации и симфоническое дирижирование. Он является автором значительного числа хоровых аранжировок, концепций исследовательских проектов и концертных программ.
В составе хора выступают профессиональные певчие: тенор Андрей Иванушкин и бас Виктор Хапров (с 1997 года), баритон и регент Сергей Григорьев (с 1999), бас профундо, Заслуженный артист России Владимир Миллер и лауреат международных конкурсов, лауреат международных конкурса бас Дмитрий Шишкин (с 2002), лауреат международных конкурсов, баритон Борис Петров (с 2012), тенор Иван Егоров и тенор Никита Черников (с 2019), тенор Данис Имамутдинов (с 2022), тенор альтино Никита Рыжов (с 2023). Ансамбль состоит из тщательно подобранных голосов: от самого низкого баса – профундо до самого высокого тенора – альтино, что позволяет успешно решать исполнительские задачи любой сложности.